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不同双歧杆菌标准品制备法的比较研究
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摘要: 目的 比较不同的双歧杆菌标准品制备法，筛选适用于实时荧光定量PCR检测的双歧杆菌标准品。方法 以双歧杆菌标准菌株作为实验菌株，分别采用菌株DNA法、PCR产物扩增纯化法、质粒DNA法制备梯度浓度标准品，运用紫外分光光度计和实时荧光定量PCR 技术进行检测，并对数据进行统计学处理。结果 实时荧光定量PCR检测发现，3种不同的双歧杆菌标准品制备法的标准曲线均 r 2 ＞0.990；不同制备法的双歧杆菌标准品DNA浓度和纯度检测比较，质粒DNA制备法所制的双歧杆菌标准品浓度和纯度较另外两种方法高，差异有统计学意义（ P<0.01）。结论 双歧杆菌质粒DNA制备法制备的标准品质量较高，适用于实时荧光定量PCR检测，可以为双歧杆菌分子生物学检测提供参考依据。Abstract: Objective To compare different preparation methods for quantitative real-time PCR (qPCR) detection of Bifidobacteria. Methods Standard strains of Bifidobacteria were prepared with concentration gradients using strain DNA, PCR product amplification and purification, and plasmid DNA methods. The concentrations of Bifidobacteria were determined with ultraviolet spectrophotometer and real-time quantitative PCR. Results Greater than 0.99 R 2 in values of standard curves were achieved by all three preparation methods. The plasmid DNA method obtained a higher level of concentration and purity of Bifidobacteria than the other two methods （ PBifidobacteria.
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期刊类型引用(2)
1. 林晓峰，努色热提·阿布都沙拉木，袁暮云，许龙岩，陈瑶. 副溶血性弧菌质粒DNA参考物质的研制. 分子诊断与治疗杂志. 2020(11): 1474-1478 . 
百度学术
2. 段晓梅，李超男，耿福能，刘彬，赵昱，李玥. 溃疡性结肠炎相关肠道菌群荧光定量PCR检测方法的建立. 大理大学学报. 2019(02): 33-37 . 百度学术
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