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  • 神经再生与调控康复的未来方向

    星形胶质细胞除提供营养、支持和保护作用外,在神经系统疾病病理过程中的其它重要作用也逐渐被揭示,如参与微环境调节和再生修复。近年来研究提示外泌体在中枢神经系统疾病诊断和治疗中,起到非常重要的作用。而来源于星形胶质细胞的外泌体能否对脑部内源性神经干细胞的功能产生影响?特别是在发病急性期可否减轻神经损伤,促进神经保护和修复? 这些问题非常值得研究。从组织修复和机体康复的角度,卒中早期有效的神经保护直接影响其后期的功能康复,促进神经保护是减少残疾的关键。本专题相关星形胶质细胞的研究通过分离原代鼠源神经干细胞和星形胶质细胞,并用超速离心鉴定出星形胶质细胞分泌的外泌体,进而对其在细胞间的通讯功能作了初步探索,具有十分重要科学价值和潜在的临床意义。

  • 外科微创化与微创外科专业化

    外科微创技术起步于30余年前,微创理念带来外科领域革命性的变化。随着高清腹腔镜、机器人辅助外科手术系统等设备的临床运用和手术技术的进步,从早期的单纯胆囊切除发展至今,微创技术普及到外科所有领域,腹腔镜胃癌根治术、肠癌根治术、肝切除等已成为大型医疗中心常规开展项目。但在胰腺外科,由于胰腺解剖结构深在、手术操作流程复杂、吻合重建多,开放的胰腺手术也存在较高的并发症发生率和死亡率。此外,临床上可切除的胰腺肿瘤病例也远少于其它专业,导致胰腺外科手术学习曲线漫长,一名成熟的胰腺外科医生成长时间也长于其它专业。因此胰腺外科的微创手术虽与其它专业同时起步,但发展缓慢。可喜的是,近十年来,随着微创技术设备的发展、电能量平台的研制及超声刀的运用,以及对胰腺精细化解剖更深入认识,胰腺外科微创技术迎来了高速发展的十年。目前国内开展微创胰十二指肠切除术(包括机器人辅助和全腹腔镜)总例数超过200例的医疗中心已有十余家,而本专题作者所在的三家医疗机构(四川大学华西医院胰腺外科、上海交通大学医学院附属瑞金医院胰腺外科、中国人民解放军总医院第一医学中心肝胆外二科)完成的总例数均超过600例,属于具有代表性的大型医疗中心。目前虽然胰腺微创手术在一些大型医疗中心已成为常规,但一些中小型医疗机构由于病例数少,掌握胰腺微创技术的学习时间曲线又长于其他专业领域,因此该技术距离普及还有很长的路要走,由彭兵教授主持的“胰腺微创手术”专题应运而生。本专题的作者们总结开展胰腺微创手术的成熟经验,将手术技术流程化、专业化,同时也介绍了复杂条件下胰腺手术中的血管切除重建技术,构成了这期专刊的丰富内容,并对胰腺微创手术的现状及发展方向作了深入浅出的阐释。

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摘要:
病理诊断在精准医学中扮演着非常重要的角色,无论是病理医生资源有限的现实,还是不断精细量化的临床诊断需求,都对精准的病理诊断能力提出了更高的挑战。医学界希望人工智能(artificial intelligence, AI)成为从多个方面解决这一难题的得力助手。本文讨论了AI推动精准病理诊断的几个方面:AI辅助病变组织的精准获取、AI辅助组织病理精准诊断、AI辅助组织学分级和定量评分、AI辅助肿瘤生物标记物的精准评估、AI辅助基于HE图像预测分子特征和精准的生物信息解读、AI辅助信息整合实现深层次的精准诊断、AI辅助基于HE图像精准预测患者的生存和预后,为读者展现AI技术为我们迎来的智慧病理的明天。
摘要:
近年来,随着图像处理和网络传输技术的进步,数字病理学在临床的应用越来越广泛,基于数字图像的人工智能辅助诊断技术不断涌现。作为应用最为广泛成熟的领域,远程病理学正通过远距离数字图像的电子传输改变着病理诊断的时空范围;全数字化病理科正在实现诊断模式和工作流程由显微镜诊断向数字图像电脑阅片的转换,而且已经有了大型全数字化病理科的成功案例。但在数字病理的实施过程中还有诸多问题(如扫描仪的质量稳定性和成本、系统的验证、工作流程的再造以及病理从业人员的培训和观念转变等)需要不断完善改进。人工智能诊断技术虽然潜力巨大,但在病理工作中的应用还仅限于辅助诊断范畴,实现全面的智慧病理诊断的路还很漫长。数字病理学的兴起,必将使病理工作的方式发生深刻的变革,同时为智慧病理奠定良好的基础。
摘要:
人工智能(artificial intelligence,AI)在病理学中最重要的潜在应用之一,是根据形态学特征预测患者的预后和对特定疗法的反应。乳腺癌作为全世界最常见的恶性肿瘤之一,也是导致女性恶性肿瘤死亡的主要原因,是临床关注的焦点。乳腺癌腋窝淋巴结转移是重要的预后因素,能否准确评估腋窝淋巴结转移情况影响临床诊疗决策。目前,基于无创手术的思想,有多项研究已开发出可用于预测乳腺癌前哨淋巴结转移的模型,但是不同预测模型应用的临床和病理参数不同,如何更全面地分析乳腺癌患者的临床和病理数据,并建立更精准的预测模型是未来的发展方向。本文通过阐述AI在病理方面的研究进展以及在乳腺癌中的研究现状,对于如何基于AI辅助有效地预估乳腺癌淋巴结转移、建立更精确有效的深度学习算法展开了深入的思考与展望,从而不断提升乳腺癌的诊治水平。
摘要:
由于胃癌早期隐匿性强,我国目前胃癌的早期诊断率仍较低,且主要依赖于病理专家人工诊断。近年来,随着人工智能和数字病理学的快速发展,以卷积神经网络为核心技术的人工智能辅助病理诊断技术不仅有望提高胃癌的诊断效率,对于提高我国胃癌的早诊早治水平,改善其高发病率、高死亡率现状,也具有重要意义。本述评旨在针对基于深度学习卷积神经网络在胃癌病理诊断中的应用及进展进行归纳,着眼于利用卷积神经网络识别癌变区域、组织学分类、判断肿瘤浸润深度、指导患者用药,总结其现存问题及未来发展。我们认为,以下局限性及困难亟待解决:病理切片数字化耗时、耗存储;数据的标注及数据的质量控制问题;数据整合问题;法律责任界定问题。未来随着人工智能与病理学的融合,基于人工智能的病理诊断将广泛应用于临床工作中,如将深度学习的卷积神经网络应用于胃早癌的筛查工作,可大为减轻病理医师的工作负担;而患者个人进行胃癌自查自检,也是人工智能辅助诊断胃癌可能实现突破的方向。
摘要:
目前,细菌感染的治疗主要使用抗生素,但随着抗生素耐药性问题越发严重,迫切需要新的治疗方法。因此,噬菌体疗法将是解决细菌耐药性的一种潜在选择,并可考虑噬菌体与抗生素联合治疗。遗憾的是,目前缺乏设计良好的噬菌体疗法临床对照试验,希望未来有更多的研究着眼于解决噬菌体疗法抗菌谱窄、安全性未知和细菌抵抗等问题。部分难治性疾病如乳腺癌和酒精性肝炎在临床治疗上也较难处理,噬菌体在这些领域成功的实验研究报道给未来更多的难治性疾病提供了新的治疗思路。除此之外,噬菌体在疫苗应用和骨再生中也有不错的表现。本文综述了上述噬菌体疗法在相关疾病的应用及其治疗机制。最后,通过对噬菌体疗法现存不足进行总结,并对其在系统性疾病中的应用前景进行展望,以期能进一步推动对噬菌体疗法的临床应用研究。
摘要:
细胞衰老是细胞永久性周期阻滞,伴有多种分泌表型的发生。除促进细胞凋亡外,诱导细胞衰老是放化疗以及某些靶向药物抑制肿瘤的重要作用机制,然而细胞衰老作为细胞的自我保护性机制,在肿瘤治疗中的作用有利有弊。如何利用细胞衰老的抑瘤效应,并有效避免其可能产生的促瘤效应,提高肿瘤治疗的敏感性,防止肿瘤的复发和转移,是细胞衰老研究的重要瓶颈问题。本文旨在综述细胞衰老在肿瘤治疗中的“双刃剑”效应,对衰老细胞通过其自主性与非自主性机制影响肿瘤治疗效果的具体机制进行归纳和讨论,为提高肿瘤治疗效果提供指导,推动细胞衰老在肿瘤治疗的基础与临床应用研究。
摘要:
“健康中国”国家战略对高质量医学教育、高水平手术研究、精准临床诊疗提出了新的要求。面向国家新医科战略发展布局,本文在概述虚拟现实概念、核心价值及其对行业支撑作用的基础上,对虚拟现实技术在新医科人才培养中的作用进行了探讨,并以典型案例的形式,详细剖析了虚拟现实技术在口腔医学和临床医学相关的实操教学、技能考核、在线自主训练、临床思维实训等方面所发挥的重要作用,以期为新医科人才培养的模式创新提供有益经验借鉴。
摘要:
  目的  通过D-半乳糖(D-galactose,D-gal)干预制备豚鼠耳蜗螺旋动脉(SMA)平滑肌细胞衰老模型,分析连接蛋白43(Cx43)与衰老相关蛋白P16和P21表达的相关性,探讨Cx43在细胞衰老中可能发挥的作用。  方法  用贴壁法培养豚鼠SMA平滑肌细胞,应用免疫荧光技术检测平滑肌细胞标记物。实验分对照组、D-gal组和D-gal+缝隙连接激动剂AAP10干预组(AAP10组)。CCK-8检测各组平滑肌细胞活性,确定D-gal干预浓度及时间;qRT-PCR检测各组Cx43 mRNA表达;Western blot检测各组Cx43、P16和P21的蛋白表达量;免疫荧光技术检测各组P16、P21的表达分布情况。  结果  免疫荧光检测结果显示细胞肌动蛋白(α-SM-actin)阳性表达率达90%以上;CCK-8检测结果显示D-gal最佳干预浓度为30 mg/mL,干预时间为48 h;qRT-PCR检测发现D-gal组平滑肌细胞上Cx43 mRNA水平较对照组降低(P<0.01);AAP10组较D-gal组细胞Cx43 mRNA水平上调(P<0.01);Western blot检测发现D-gal组平滑肌细胞上Cx43蛋白水平较对照组降低(P<0.01);P16和P21蛋白表达较对照组升高(P<0.01);AAP10组较D-gal组细胞Cx43蛋白表达上调(P<0.01),P16、P21蛋白表达下调(P<0.01);免疫荧光结果显示P16和P21主要表达于细胞核上,P16和P21蛋白在D-gal组较对照组细胞荧光强度升高,AAP10组较D-gal组荧光强度下降(P<0.01)。  结论  上调Cx43的表达可以逆转D-gal诱导的SMA上衰老相关蛋白P16和P21的表达异常。提示Cx43可能参与细胞衰老过程,为延缓细胞衰老提供理论依据和可能的干预靶点。
摘要:
  目的  选取婴儿利什曼原虫的PepckGp63的优势表位基因,构建Pepck-Gp63二联优势表位的原核与真核重组表达载体并表达蛋白。  方法  用计算机分析预测磷酸烯醇丙酮酸羧基酶(phosphoenolpyruvate carboxylase, PEPCK)的二级结构及HLA表位,筛选出优势表位。根据本实验室之前对表面蛋白酶63(glycoprotein of 63×103, GP63)用相同的方法分析而筛选的表位结果,把PepckGp63的优势表位基因通过重叠PCR和酶切连接反应构建出重组原核表达质粒pET32a-Pepck-Gp63,并诱导其在大肠杆菌中表达;构建出重组真核表达质粒pVAX1-Pepck-Gp63,用脂质体转染法把真核质粒转染到NIH3T3细胞中表达。  结果  Pepck存在多个优势表位;测序结果表明二联优势表位基因Pepck-Gp63连接成功;PEPCK-GP63蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达并在SDS-PAGE电泳-考马斯亮蓝染色的结果中呈现相对分子质量为74×103大小的条带;细胞免疫荧光中被pVAX1-Pepck-Gp63转染的NIH3T3细胞呈阳性。  结论  成功构建重组原核表达质粒pET32a-Pepck-Gp63和重组真核表达质粒pVAX1-Pepck-Gp63,并分别在大肠杆菌和NIH3T3细胞中验证重组质粒能表达相应目的蛋白,为后续的免疫策略研究提供初步实验基础。
摘要:
  目的  明确腺病毒55型(HAdV-55)对人肠道细胞的感染性。  方法  体外培养人结直肠腺癌细胞Caco-2,以HAdV-3、7、14和55感染,免疫荧光法检测感染细胞内病毒蛋白的表达,荧光定量PCR方法检测不同时间点细胞内和上清中病毒DNA水平,采用腺病毒敏感细胞株HEp-2感染实验检测Caco-2细胞上清中感染性病毒颗粒水平。  结果  免疫荧光检测结果显示,感染48 h后,Caco-2细胞内HAdV-55病毒蛋白表达为阳性。HAdV-3、7、14、55在Caco-2细胞内均能持续复制和增殖,感染细胞内和上清中病毒DNA水平随感染时间的增加而升高,并且HAdV-55病毒DNA水平明显高于HAdV-3、7和14型。Caco-2上清中HAdV-55感染性病毒颗粒高于HAdV-3、7和14,差异有统计学意义(P<0.05)。采用低剂量病毒〔1×半数组织培养感染剂量(TCID50)〕感染Caco-2细胞,HAdV-55感染孔细胞病变效应(CPE)比HAdV-3、7和14感染孔细胞显著。  结论  人呼吸道病毒HAdV-55对肠道细胞易感,感染水平高于其他常见的呼吸道感染腺病毒3、7和14型。