目的  研究短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）沉默结肠癌相关转录因子2（colon cancer associated transcript 2, CCAT2）对非小细胞肺癌耐顺铂（cisplatin，DDP）细胞株（A549/DDP）的增殖、侵袭和凋亡以及体内肿瘤形成的影响。

  方法  shRNA-CCAT2（sh-CCAT2）或shRNA-阴性对照（shRNA-NC）转染A549/DDP细胞（并设未经处理的A549/DDP细胞为对照组），通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）检测3组A549/DDP细胞CCAT2 mRNA表达；通过MTT实验检测3组A549/DDP细胞经过不同质量浓度（0～8 mg/L）DDP处理后的增殖能力变化，并依此选定2 mg/L DDP进行后续实验。采用克隆形成实验、流式细胞法、Transwell实验检测2 mg/L DDP处理对各组细胞（并设未经处理的A549/DDP细胞为对照组）增殖、凋亡、侵袭的影响，用Western blot检测各组细胞增殖标记蛋白〔Ki67蛋白、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）〕、凋亡标记蛋白（Caspase-3、Caspase-9）、侵袭标记蛋白〔血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、基质金属蛋白酶-14（matrix metalloproteinase-14，MMP-14）〕蛋白的表达。裸鼠皮下注射A549/DDP细胞、转染shRNA-NC和转染sh-CCAT2的 A549/DDP细胞，每3 d腹腔注射DDP 2 mg/kg，连续给药7次，另设对照组（皮下注射A549/DDP细胞，腹腔注射等量生理盐水）。检测每5 d肿瘤体积，共30 d。30 d后处死取肿瘤组织，RT-PCR检测CCAT2 mRNA表达，TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡。

  结果  与对照组和shRNA-NC转染组相比，sh-CCAT2转染A549/DDP细胞后，细胞CCAT2 mRNA表达降低（P<0.01），2～8 mg/L DDP作用后细胞增殖抑制更明显（P<0.01）。与对照组相比，DDP处理的3组细胞克隆形成减少，增殖标记蛋白Ki67和PCNA表达减少（P<0.01）；细胞凋亡率增加，凋亡标记蛋白Caspase-3和Caspase-9表达增多（P<0.01）；细胞侵袭数目减少，侵袭标记蛋白VEGF和MMP-14表达降低（P<0.01）；DDP处理的3组细胞中，sh-CCAT 2转染的细胞上述表现最为明显（P<0.01）。体内实验显示，与对照组相比，3个DDP组肿瘤体积减小，30 d时差异有统计学意义（P<0.01）；肿瘤组织CCAT2 mRNA表达减少（P<0.01），细胞凋亡增加（P<0.01）。3个DDP组中，接种sh-CCAT2转染的 A549/DDP细胞组上述表现最为明显（P<0.01）。

  结论  sh-CCAT2可以抑制A549/DDP细胞的增殖、诱导细胞凋亡和降低细胞的侵袭能力，从而抑制A549/ DDP细胞生长。